Разработка нового адъюванта на основе растительных иммуностимуляторов для интраназальной иммунизации против гриппа
Руководитель проекта: Саданов А.К.
Исполнители проекта: Березин В.Э.
Организация: Институт микробиологии и вирусологии
Инвентарный номер: 0215РК00694
Регистрационный номер: 0115РК01097
Ключевые слова: адъювант*иммуностимуляторы*интраназальная иммунизация*противовирусный иммунитет
Отработана техника сборки наночастиц, содержащих липиды и очищенные иммуностимулирующие тритерпеновые сапонины. Установлено, что все четыре препарата очищенных сапонинов (OS1, GA1, PG1 и GH1) способны индуцировать формирование нанокомплексов с липидами. Для получения иммуностимулирующих нанокомплексов отобран неионный детергент МЭСК, как наиболее подходящий по мягкости воздействия на биологически активные молекулы и способности быстро и полностью удаляться из смеси сапонинов и липидов диализом. Исследовано влияние липидного компонента на формирование иммуностимулирующих нанокомплексов и апробировано действие различных типов липидов: яичного лецитина, холестерола, фосфатидилэтаноламина, фосфатидилхолина. Установлено, что наибольшую активность в связывании с растительными сапонинами проявляют холестерол и фосфатидилхолин. При этом наибольшее количество нанокомплексов формируется при соотношении сапонин:холестерол:фосфатидилхолин равном 1:1:1. Отработана технология получения ИСМ-адъювантов на основе нанокомплексов очищенных сапонинов и липидов. Показано, что оптимальным методом получения очищенных иммуностимулирующих сапонинов из растительных экстрактов является высокоэффективная жидкостная хроматография на колонке С18. Также показано, что применение 6-часового цикла диализа с 3-х кратной заменой буферного раствора является достаточным для полного удаления применяемого в технологии неионного детергента и получения иммуностимулирующих нанокомплексов сапонинов и липидов. Установлено, что ИСМ-адъюванты (OS1, GA1, PG1) можно отнести к 3 классу токсичности лекарственных соединений (малотоксичные вещества) в соответствии с нормативными документами изучения безопасности лекарственных соединений. Показано, что ИСМ-адъюванты, содержащие сапонины OS1, GA1 и PG1 обладают выраженными иммуностимулирующими свойствами. Полученные образцы ИСМ-адъювантов на основе нанокомплексов липидов и очищенных сапонинов, выделенных из растений флоры Казахстана, способны значительно повышать активность специфического гуморального иммунного ответа на введение субъединичной гриппозной вакцины. В отличие от обычных препаратов очищенных сапонинов, ИСМ-адъюванты обладают значительно меньшей токсичностью и большей иммуностимулирующей способностью, что делает их весьма привлекательными для включения в состав вакцинных препаратов.