Определена нуклеотидная последовательность генов, ответственных за выработку белков Gn и Gc. Получены и клонированы в клетки линии НЕК293, рекомбинантные плазмиды pProtA-ectoGn и pEB-ectoGc, способные экспрессировать гены эктодоменов Gn и Gc вируса Конго-крымской геморрагической лихорадки(ККГЛ). Рекомбинантные антигены Gn и Gc обнаружены и выделены из жидкости при культивировании трансформированных клеток линии НЕК 293Т. Показано, что очистка рекомбинантных антигенов методом аффинной хроматографии повышает их концентрацию, но при этом сохраняется примесь посторонних белков, что обуславливает необходимость продолжения исследований по подбору методов очистки рекомбинантных антигенов. С использованием инактивированного вирусного антигена, белка А золотистого стафилококка, конъюгированного с пероксидазой хрена, получена иммуноферментная тест-система для выявления антител к вирусу ККГЛ у различных видов животных и человека.

Выделены очищенные препараты тотальной РНК из культуры клеток гепатоцеллюлярной карциномы человека. Сопряженные реакции обратной транскрипции и полимеразная цепная реакция с синтетическими праймерами амплифицировали полноразмерный кДНК-ген альфа-фетопротеина человека. Проведено клонирование полученного кДНК фрагмента в вектор pET19b. Рекомбинантной плазмидой pET19b(AFPh) проведена трансформация E.coli штамма BL21(DE3) pLysS. Вестерн-анализ показал присутствие в клетках белка, соответствующего белку альфа-фетопротеина человека. Показана экспрессия целевого гена в гетерологичной системе - клетках бактерии E.coli. Получены рекомбинантные плазмиды для транскрипции мРНК альфа-фетопротеина человека с различными 5\'-нетранслируемыми последовательностями. Трансляция мРНК показала, что в растительной бесклеточной системе из зародышей пшеницы может корректно синтезироваться альфа-фетопротеин человека.

Исследованы биологические образцы от птиц водного и околоводного комплексов, а также гемагглютинирующие агенты, выделенные от диких птиц в Центральном Казахстане. Собраны 469 биологических проб в виде клоакальных и трахеальных смывов от 302 диких птиц относящихся к 18 видам десяти семейств (Пеликановые, Баклановые, Цаплевые, Ибисовые, Фламинговые, Утиные, Пастушковые, Чайковые, Тиркушковые) из семи различных отрядов (Поганкообразные, Веслоногие, Аистообразные, Фламингообразные, Гусеобразные, Журавлеобразные, Ржанкообразные). В результате вирусологического исследования на развивающихся куриных эмбрионах от диких птиц выделены 8 вирусов гриппа А. Изоляты А\голубая чернеть/Балхаш/6279/14, А\голубая чернеть/Балхаш/6289/14 относились к подтипу А/Н10; шесть вирусов А\черноголовый хохотун/Атырау/6491/15, А\черноголовый хохотун/Атырау/6492/15, А\серебристая чайка/Атырау/6525/15, А\серебристая чайка/Атырау/6527/15, А\серебристая чайка/Атырау/6533/15, А\серебристая чайка/Атырау/6538/15 - к подтипу А/Н5.

Исследованы культура фибробластов куриных эмбрионов, вирус герпеса индеек и технологические параметры культивирования и продукции этих биологических объектов. Разработаны технологическая схема и параметры производства вирусной массы герпесвируса индеек, биомасса иммунизирующего агента; реакторная модель поддержания жизнеспособности культуры фибробластов и продукции вирусной массы в этой модели глубинным способом. Используя суспензионный способ можно значительно упростить технологический цикл производства биомассы вируса, увеличить несколько кратно объем производимого вирусного сырья и минимизировать объем бракуемой продукции, материалов и средств. Кроме того при использовании глубинной технологии в три и более раза сокращается количество обслуживающего технического персонала, на столько же кратно сокращается время предварительной подготовки процесса. При предлагаемом глубинном способе применяется объективная оценка путем подсчета концентрации живых клеток в камере Горяева или другим автоматизированным счетным прибором.

Исследованы раковые стволовые клетки, натуральные киллерные клетки. Разработана технология получения CSC из опухолевой ткани и клеточных культур опухолевых линий человека. Среди туморосфер, полученных из линии панкреатических опухолевых клеток - MiaPaCa-2, наблюдался больший процент клеток, имеющих фенотип CSC (CD133+CD44v6+), а также клеток, экспрессирующих опухолевый маркер - виментин и протинкиназные рецепторы к тромбоцитарным ростовым факторам (PDGFальфа и PDGFбета) по отношению к родительской линии. Опытным путем было установлено, что комбинация фактора некроза опухоли альфа (TNFальфа) и трансформирующего фактора роста опухоли бета (TGFбета) значительно усиливают экспрессию маркеров CSC. Также, в результате фенотипического анализа туморосфер был выявлен значительно больший процент клеток, несущих лиганды для NK-клеточных рецепторов (ULBP-2/5/6, ULBP-3, CD112, CD155, MICA/MICB) и молекулы MHC-I (HLA-ABC, HLA-E) в сравнение с родительской линией. Впервые обнаружено существенное повышение экспрессии ингибиторного рецептора TIGIT на поверхности NK-клеток после воздействия факторов, секретируемых опухолевыми клетками (K562, HepG2), ассоциированное с подавлением цитолитической активности NK-клеток на 20 %.

Исследованы миелоидные супрессорные клетки мышей. Разработана экспериментальная модель системного воспаления у мышей, основанная на многократном введении высоких доз фармакологического препарата беталейкин. В ранний срок наблюдения (2 недели) при этой модели происходило двукратное увеличение уровня содержания в селезенке одной из фракций M-MDSC (CD11b+Gr-1highCD49d+), а также повышение уровня MDSC, несущих рецепторы к хемокинам RANTES (CD11b+Gr-1+CD195+) и к лигандам эндотелия сосудов (CD11b+Gr-1+CD62L+). Установлено, что развитие хронического на модели адъювантного артрита, ведет к увеличению процентного содержания MDSC к концу 2-й недели после введения полного адъюванта Фрейнда. В ходе изучения факторов мобилизации MDSC обнаружено значительное увеличение процента CD11b+Gr-1+-клеток, экспрессирующих CD184, на всех исследуемых сроках. К 4 неделе развития хронического воспаления в селезенке повышалось содержание клеток с фенотипом CD11b+Gr-1+CD195+. Таким образом, процессы, ассоциированные с механизмами развития хронического воспаления, вели к повышению уровня MDSC и их способности мигрировать в очаг воспаления, за счет повышения экспрессии рецепторов к SDF-1альфа и RANTES.

Исследованы изоляты Brucella sp. Пополнена коллекция и создана база данных генетических профилей казахстанских изолятов Brucella sp., что является необходимым условием для постоянного контроля эпидемиологической обстановки по бруцеллезу на территории нашей страны и своевременной оценки эффективности проводимых противоэпидемических мероприятий. По результатам филогенетического анализа установлено, что все 94 изолята выделенные как от животных, так и от людей принадлежат виду Brucella melitensis и относятся генетическому семейству East mediterranean (Восточно-Средиземноморский тип), значительно преобладающему над другими на территории Казахстана. Установлено, что отдельные генотипы бруцелл образуют относительно крупные кластеры на ветвях филогенетического древа. Анализ географического распределения этих изолятов не показал большой плотности и сосредоточения в каком либо месте, что может свидетельствовать о широкой диссеминации отдельных \"успешных\" генотипов, которые по каким-то причинам имеют преимущества над остальными. Накопление в дальнейшем большего количества эпидемиологической информации и результатов генетических скринингов, даст возможность отслеживать отдельные штаммы возбудителя бруцеллезной инфекции и выявлять очаги ее распространения.

Исследованы образцы ДНК казахов, выделенные из буккального эпителия. Составлена коллекция ДНК, состоящая из 360 образцов казахов Южно-Казахстанской, Жамбылской и Алматинской областей. Определены гаплогруппы Y-хромосомы путем анализа 20 однонуклеотидных полиморфизмов и гаплотипы по панели 25 микросателлитных локусов Y-хромосомы для 200 образцов коллекции. Создана электронная база данных о генетической структуре Y-хромосомы казахов различных родов, включающая данные по однонуклеотидному полиморфизму в 20 локусах и микросателлитному полиморфизму в 25 локусах, набор первичных данных, собранных в результате анкетирования доноров буккального эпителия, а также количественные и качественные показатели выделенной ДНК для 200 образцов коллекции. Построены медианные сети гаплотипов для 138 образцов гаплогрупп С3, J1 и О3 Y-хромосомы.

Проведен сбор биоматериала и создан генетический банк, представляющий собой образцы замороженной периферической крови и ДНК людей (102 человека) с сердечнососудистыми заболеваниями и сахарным диабетом 2 типа. На основе анализа анкетных данных и медицинского статуса доноров сформированы когорты для исследования методом \"случай-контроль\". Анкетные данные больных и здоровых людей внесены в электронную базу данных. Выделены ДНК больных и здоровых людей. Для проведения генотипирования по основным кандидатным генам, участвующим в патогенезе возраст-ассоциированных заболеваний и раннем старении у казахстанцев, произведен подбор и синтез специфических праймеров к генам иммунного ответа (TLR2 Arg753Gln и TLR4 Asp299Gly).

Экспериментальное обоснование возможности интравитреального введения препарата мочевины (изучение токсичности, реакции окружающих тканей, а также выбор оптимальных доз для индукции ЗГМ СТ), выполнена на 60-ти глазах 30-ти кроликов. Морфологические исследования глазных яблок после интравитреального введения раствора мочевины с целью индукции задней отслойки стекловидного тела показали возможность практического использования данного способа. При интравитреальном введении высоких доз водного раствора мочевины (12 %, 24 %, 48 % и 96 %) выявлены выраженные альтеративные и воспалительные процессы во внутренних структурах глаз, обусловленные прямым токсическим действием мочевины. При времени экспозиции 30 суток, отмечались регенераторно-пластические изменения, обусловленные процессами адаптации и компенсации в ответ на длительное токсическое действие мочевины.