Разработана тест-система для диагностики хламидиоза сельскохозяйственных животных
Исследователи Научно-производственного предприятия «Антиген» (ТОО НПП «Антиген») разработали рекомбинантную иммуноферментную тест-систему на основе экспрессирующих векторов, в комплекте с очищенными иммуноглобулинами. Разработка имеет большое значение для эффективной и оперативной диагностики хламидиоза сельскохозяйственных животных.
Диагностика хламидиоза сельскохозяйственных животных представляет значительную проблему в связи с многообразием форм антигенов хламидий, течением и проявлением болезни.
Появляется все больше свидетельств того, что хламидийные инфекции могут приводить к неблагоприятным исходам беременности у людей и домашних животных. Известно, что хламидиоз является заболеванием с множественным хозяином, поражающим огромное разнообразие позвоночных, и несущий не только сельскохозяйственный, но и социальный ущерб.
Как правило, диагностировать хламидийную инфекцию путем выделения возбудителя сложно, так как для выявления требуется более 2 недель. Поэтому необходимо применять современные методы диагностики, такие как, например, ИФА.
Диагностические исследования проводят серологическим, молекулярно-биологическим, гематологическим, клиническим, патоморфологическим методами, методом биопробы. Именно поэтому важнейшее значение при выборе диагностикума имеет антигенное состав штаммов, входящих в состав тест-системы. Такой подход способствует выявлению специфических антител в сыворотке больных животных и последующей изоляции инфицированных животных.
Цель научно-исследовательской работы – разработка рекомбинантной иммуноферментной тест-системы на основе экспрессирующих векторов, в комплекте с очищенными иммуноглобулинами, что будет гарантией высокой чувствительности и специфичности тест-системы для диагностики хламидиоза сельскохозяйственных животных. Цель проекта достигнута путем применения методов конструирования экспрессирующих векторов и создания рекомбинантного штамма B. subtilis.
В ходе реализации проекта получены следующие результаты:
1. Разработана технология получения экспрессирующих векторов белков Pmps штамма Ch. Abortus
2. Отработаны методы гипериммунизации лошадей продуцентов. Отработаны режимы хроматографической очистки диагностических иммуноглобулинов.
3. Отработаны режимы глубинного культивирования рекомбинантного штамма B. subtilis в биореакторе. С учетом режимов ручного и автоматического управления температуры, уровня растворенного кислорода (DO), уровня pH, скорость оборотов мешалки, с культивированием в различных композициях питательных сред.
4. Разработаны математические модели кинетики накопления рекомбинантного штамма B. Subtilis. Математические модели внедрены в технологические процессы глубинного культивирования бактерий в биореакторах, с внедрением в перечень Стандартных операционных процедур ТОО НПП «Антиген».
5. Проведена сборка иммуноферментной тест-системы. Проведено испытание опытного образца, проведены межлабораторные сличительные испытания.
6. Разработана и утверждена нормативно–техническая документация, проведена апробация тест-системы.
Научный проект АР 14870028 Разработка рекомбинантной иммуноферментной тест-системы на основе экспрессирующих векторов для диагностики хламидиоза сельскохозяйственных животных
Научный руководитель Н. Ахметсадыков, доктор ветеринарных наук, профессор
